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96孔板厂家聊一聊PCR引物有哪些类型

  在生物学中,聚合酶链反应(PCR)是一种复制DNA片段的方法,可以从少量样品中产生数百万个DNA拷贝。96孔板厂家告诉大家,引物是在实验室中制备的短DNA链,通常长度约为20个核苷酸。由于引物是定制设计的,因此它们可以包含许多不同的核苷酸序列,研究人员可以选择适合其需求的引物。理想情况下,应选择引物以提供可能的特异性,同时仍保持有效的PCR扩增过程。
 
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  要开始PCR过程,DNA聚合酶(一种合成DNA的酶)先需要与新的DNA核苷酸连接的碱基。引物是DNA(或RNA)链,是DNA复制过程的初始基础。它们用于分割要扩增的DNA模板片段。在PCR期间,两个引物与DNA片段匹配。在退火过程中,一个引物连接到顶部链,另一条引物连接到样品两端的底部链。尽管可以使用由RNA组成的引物,但DNA引物在温度上更稳定,因此在PCR中更常见,这在退火过程中很重要。
 
  引物有几种类型,包括“通用引物”,“特异性引物”,“简并引物”和“荧光标记引物”。选择正确的引物是决定PCR结果和质量的关键因素之一。使用错误的底漆甚至可能导致反应失败。因此,有关DNA序列的信息越多,就越容易选择合适的引物来完成此任务,并且在需要特定基因的地方可以使用特定引物。
 
  引物对
 
  引物对由上引物和下引物组成。尽管可以使用两种不同的引物形成引物对,但重要的是引物具有相似的解链温度,以促进PCR反应的成功。该软件可用于识别潜在的引物对,提供其融解和退火温度以及其他详细信息,并为各种引物对提供替代选项。
 
  通用引物
 
  顾名思义,通用引物是可以与许多不同类型的DNA模板退火的引物。通用引物用于许多PCR反应中,涉及克隆载体和DNA分子中常见的核苷酸序列。对于许多PCR应用而言,通用引物足以促进成功的DNA扩增过程。
 
  特定引物
 
  已知当已知基因序列或特定基因为靶标时,可以使用特定引物代替通用引物来扩增DNA。这样做的优点是可以特异性地设计特异性引物以扩增特异性基因,从而增加成功PCR结果的机会。特异性引物也称为“类型特异性引物”,“靶标特异性引物”或“物种特异性引物”。
 
  单个引物和引物对
 
  PCR单(正向或反向)引物可用于执行PCR过程以产生单链DNA。但是,每个循环获得的DNA量将比传统PCR扩增获得的DNA量低得多(十倍)。有时使用单引物PCR扩增与已知DNA片段相邻的未知DNA片段。单引物技术也用于基于PCR的循环测序。
 
  特定引物
 
  其他类型的引物包括那些被荧光染料标记的引物,称为“荧光标记引物”,并且可以在许多研究应用中使用。
 
  简并引物
 
  “简并引物”由两个相似的引物组成,尽管非常相似但不相同。简并引物具有特殊用途,例如从两个不同的生物体复制相同的基因,已广泛用于微生物生态学。
 
  实际上,通用引物可以与特定引物配对,从而使生成的引物对独特。已经对引物和引物对进行了数百种修饰。可以使用在线工具来设计引物(特定或通用),并且可以在Internet和该主题的教科书中找到更多的引物。
 

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